王婧 张楠 余烁 刘新丽 卢弘
Wang Jing, Zhang Nan, Yu Shuo, Liu Xinli, Lu Hong
摘要: 目的 探讨低剂量脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)预处理对内毒素诱导葡萄膜炎(endotoxin induced uveitis,EIU)动物模型炎症程度的影响,并分析虹膜睫状体组织中PI3K/AKT表达水平的改变。设计 实验研究。 研究对象 8-10周龄健康雄性Wistar大鼠90只。方法 随机分为正常对照(normal control,NC)组、内毒素耐受(endotoxin tolerance, ET)组和内毒素诱导的葡萄膜炎(EIU)组,每组30只。通过皮下注射1 mg/kg LPS建立内毒素诱导的葡萄膜炎动物模型。ET组:EIU模型诱导之前连续5日腹腔注射0.1 mg/kg LPS诱导内毒素耐受。 EIU组及NC组连续5日注射等体积生理盐水。第6天相同时间ET组及EIU组接受200 μg LPS皮下注射,NC组接受等体积生理盐水注射。注射后 24小时,在裂隙灯显微镜下进行临床评分。眼球摘除行HE染色组织病理学观察。ELISA测量房水TNF-α浓度,蛋白印迹法检测虹膜睫状体PI3K和AKT蛋白的表达。 主要指标 眼前节炎症反应评分,虹膜切片HE染色观察,房水TNF-α浓度及虹膜睫状体PI3K/AKT蛋白表达。 结果 临床评分ET组、EIU组、NC组分别为(1.65±0.49)、(6.65±0.59)、(0.20±0.41)分( ?字2= 53.261,P=0.001);组织病理评分ET组、EIU组、NC组分别为(0.6±0.5)、(3.8±0.4)、(0.2±0.4)分(?字2= 46.137,P=0.001)。房水TNF-α浓度 ET组、EIU组、NC组分别为(10.58±0.67)、(30.96±1.55)、(10.32± 0.61)pg/ml(F=260.08,P=0.03)。蛋白印迹法显示虹膜睫状体组织中PI3K和AKT的蛋白水平ET组、EIU组、NC组分别为(0.197±0.019)、(0.539±0.017)、(0.453±0.014)(F=210.66,P=0.002)和(0.234±0.019)、(0.553±0.013)、(0.428±0.002)(F=275.35,P=0.001)。结论 内毒素耐受可以降低大鼠内毒素诱导的葡萄膜炎的炎症反应程度,下调虹膜睫状体组织中PI3K和AKT的表达,揭示内毒素耐受对EIU的保护机制可能与PI3K/AKT信号通路有关。(眼科, 2020, 29: 50-54)