小梁网干细胞的归巢及其在小梁创伤愈合中的作用
辛晨 武珅 杜仪琴 王宁利
- 100005首都医科大学附属北京同仁医院 北京同仁眼科中心 北京市眼科研究所 眼科学与视觉科学北京市重点实验室 （辛晨、武绅、王宁利）；PA 15213 匹兹堡大学眼科和发育生物学系 （杜仪琴）
Trabecular meshwork stem cells homing and effect on the wound-recovering of trabecular meshwork
XIN Chen1, WU Shen1, DU Yi-qin2, WANG Ning-li1
- 1. Beijing Institute of Ophthalmology, Beijing Tongren Eye Center, Beijing Key Laboratory of Ophthalmology and Visual Sciences, Beijing Tongren Hospital, Capital Medical University, Beijing 100005, China; 2. Department of Ophthalmology, Department of Developmental Biology, University of Pittsburgh, Pennsylvania, PA 15213, United State
摘要：
目的 研究胶原蛋白在小梁网干细胞（trabecular meshwork stem cells，TMSC）归巢中的作用以及小梁网（trabecular meshwork，TM）细胞和TMSC在创伤愈合中的相互作用。 设计 实验研究。研究对象 人原代TM细胞和TMSC。方法 分离、培养和传代人TM细胞和TMSC，通过定量RT-PCR和地塞米松诱导方法明确细胞类型；通过细胞贴附实验评价TM细胞及胶原蛋白对TMSC的亲和力；利用划痕损伤实验和时差显微镜观察TMSC分布及其与TM的相互作用。主要指标 TMSC和TM细胞的鉴定、TMSC穿膜数量和划痕损伤实验中TM细胞的迁移状态。 结果TMSC高表达OCT4而TM细胞高表达CHI3L1和MYOC，地塞米松刺激后TM细胞MYOC的表达显著增加。TMSC在含有TM细胞、胶原蛋白、TM细胞＋胶原蛋白的培养皿中的穿膜数分别为（13.1±5.3）个/高倍视野、（22.6±10.1）个/高倍视野、（4.8±2.2）个/高倍视野，均明显高于在单纯细胞培养皿中的穿膜数（3.7±0.5）个/高倍视野（P=0.0009，<0.0001，<0.001）。用AMD3100抑制TMSC中CXCR4的表达后，TMSC在各种状态的迁移数量差异消失。在TM细胞划痕损伤模型中加入TMSC可促进TM细胞的分化和迁移。结论 TMSC可诱导小梁网细胞分裂向受损区域迁移，从而促进组织损伤修复。胶原蛋白在TMSC归巢过程中发挥重要作用。