双氢青蒿素对棘阿米巴抑制作用的实验研究
- 100005 首都医科大学附属北京同仁医院 北京同仁眼科中心 北京市眼科研究所 眼科学与视觉科学北京市重点实验室
Experimental study on the inhibitory effect of dihydroartemisinine on acanthamoeba
WANG Zhi-qun, JIANG Chao, ZHANG Xiao-yu, ZHANG Yang, QU Jing-hao, TIAN Lei, SUN Xu-guang
- Beijing Institute of Ophthalmology, Beijing Tongren Eye Center, Beijing Key Laboratory of Ophthalmology and Visual Sciences, Beijing Tongren Hospital, Capital Medical University, Beijing 100005, China
摘要：
目的 评价双氢青蒿素对棘阿米巴的体外抑制作用。设计 实验研究。研究对象 临床患者角膜分离的阿米巴虫株。方法 体外培养阿米巴虫株，加入不同稀释浓度（3.2%、1.6%、0.8%、0.4%、0.2%、0.1%、0.05%、0.025%和0.0125%）的双氢青蒿素（DHA）共同孵育，同时以洗必泰（CHG）和聚六甲基双胍（PHMB）做对照药物，通过转种阿米巴培养基和LIVE/DEAD染色观察药物对阿米巴活性的抑制作用。主要指标 光学显微镜观察药物作用后虫体形态变化；LIVE/DEAD染色后，荧光显微镜下阿米巴活性情况，计算最小杀包囊浓度（MCC）和最小杀滋养体浓度（MTAC）值，以及各MTAC和MCC水平下阿米巴虫株的累计分布率，即MTAC50或MCC50和MTAC90或MCC90。结果 药物抑制后的阿米巴包囊干瘪皱缩，LIVE/DEAD法观察，受抑制的包囊呈红色，无活性。DHA组MTAC和MCC值范围均为0.05%~1.6%。MTAC50和MCC50值均为0.4%，MTAC90和MCC90值均为1.6%；CHG组MTAC值范围0.0125%~1.6%，MCC值范围0.0125%~0.8%，MTAC50和 MCC50值分别为0.05%和0.1%，MTAC90和MCC90值均为0.8%。PHMB组MTAC值范围0.00625%~0.4%，MCC值范围0.00625%~0.2%，MTAC50和MCC50值均为0.025%，MTAC90和MCC90值均为0.2%。三组药物对不同阿米巴菌株的MCC和MTAC相比较均无统计学差异（P=0.342、0.459、0.469）。三组MTAC值总体比较DHA组最高，CHG组次之，PHMB组最低（F=3.813，P=0.035)。其中，DHA组高于PHMB组（P=0.011）；DHA组和CHG组以及CHG组和PHMB组比较差异无统计学意义（P=0.105和0.297）。三种药物组的MCC值总体比较差异有统计学意义（F=6.672，P=0.004)， DHA组比CHG组高，DHA组比PHMB组高（P=0.017和0.001）； CHG组与PHMB组无差异（P=0.325）。结论 双氢青蒿素在体外对棘阿米巴有抑制作用，其临床治疗阿米巴性角膜炎的作用仍待验证。